神經(jīng)元的發(fā)育關(guān)鍵時(shí)期存在于生命中的有限階段,在此期間神經(jīng)連接的可塑性達(dá)到大,大腦的發(fā)育開始慢慢適應(yīng)環(huán)境。比薩高等師范學(xué)校和耶拿萊布尼茲老齡研究所(FLI)的研究人員發(fā)現(xiàn),在這些依賴于學(xué)習(xí)的可塑性階段中,小microRNA(miR-29)的作用。研究發(fā)現(xiàn),幼鼠中miR-29濃度過早升高會阻止皮質(zhì)可塑性,而成年動物中miR-29的阻斷會誘導(dǎo)年輕階段的經(jīng)典可塑性。上述結(jié)果表明表明miR-29是年齡依賴性的發(fā)育可塑性調(diào)節(jié)劑。
“在敏感的發(fā)育階段,視覺皮層中的神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)在較大程度上適應(yīng)了視覺刺激。這使我們能夠確定大腦可塑性的重要調(diào)節(jié)劑,”這項(xiàng)研究在EMBO Reports雜志上發(fā)表,SNS的Alessandro Cellerino教授說。耶拿FLI的小組負(fù)責(zé)人以及佛羅倫薩大學(xué)和比薩NRC神經(jīng)科學(xué)研究所的Tommaso Pizzorusso教授是該研究的作者。
Cellerino教授解釋說:“視覺皮層回路是視覺系統(tǒng)的一部分,能夠?qū)崿F(xiàn)視覺,在早期生命中就表現(xiàn)出很強(qiáng)的可塑性,后來通過分子制動來穩(wěn)定,從而限制了關(guān)鍵時(shí)期后鏈路的過度適應(yīng)。”然而,在從發(fā)育到成年的過渡過程中,協(xié)調(diào)這些因子表達(dá)的潛在機(jī)制仍然未知。
為了確定調(diào)節(jié)視覺皮層產(chǎn)后發(fā)育的因素,研究小組分析了小鼠視覺皮層發(fā)育中的miRNA / RNA數(shù)據(jù)集。他們在不同的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行了比較:P10,即出生后第10天以及緊接睜眼和敏感期發(fā)作之前的第10天,以及當(dāng)小鼠皮質(zhì)達(dá)到功能成熟時(shí)的P28。
他們的結(jié)果表明,microRNA家族miR-29是視皮層發(fā)育可塑性的年齡依賴性調(diào)節(jié)劑。 FLI / SNS的Cellerino教授解釋說:“ miR-29a增加30倍,是敏感期中表達(dá)高的miRNA。”在魚類,小鼠和人類中,miR-29家族的調(diào)控非常保守。此外,miR-29調(diào)節(jié)的靶標(biāo)中有一半以上隨著年齡而下調(diào),包括腦可塑性的關(guān)鍵調(diào)節(jié)劑。這表明miR-29a是下游發(fā)育過程的重要調(diào)節(jié)劑。
進(jìn)一步的分析表明,年輕小鼠中miR-29a濃度的過早升高會阻止優(yōu)勢可塑性,并導(dǎo)致早期出現(xiàn)神經(jīng)周圍網(wǎng)(PPNs)。 PPN是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的專門結(jié)構(gòu),負(fù)責(zé)成人大腦中的突觸穩(wěn)定作用。在發(fā)育中的大腦和成年大腦中,它們在破壞可塑性和維持神經(jīng)細(xì)胞之間現(xiàn)有的連接方面都起著至關(guān)重要的作用。
胎牛血清 在細(xì)胞培養(yǎng)中的作用:
1. 提供對維持細(xì)胞指數(shù)生長的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營養(yǎng)物,以及主要的低分子營養(yǎng)物。
2. 提供結(jié)合蛋白,能識別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)節(jié)它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。
3. 有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。
4. 是細(xì)胞貼壁、鋪展在塑料培養(yǎng)基質(zhì)上所需因子來源。
5. 起酸堿度緩沖液作用。
6. 提供蛋白酶抑制劑,使在細(xì)胞傳代時(shí)使剩余胰蛋白酶失活,保護(hù)細(xì)胞不受傷害。
7. 參與細(xì)胞凍存。
在細(xì)胞培養(yǎng)中,胎牛血清加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基的濃度大多為5%~20%(常見為10%)的。具體到不同試驗(yàn),應(yīng)依據(jù)文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo),或細(xì)胞類型或基礎(chǔ)培養(yǎng)基的成分來確定濃度。
胎牛血清應(yīng)在-20℃儲存,運(yùn)輸應(yīng)干冰冷鏈運(yùn)輸,避免反復(fù)凍融,確保血清中因子活性不受影響,保證血清優(yōu)良品質(zhì)。