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高效復蘇細胞有沒有什么秘訣?

更新時間:2022-12-20  |  點擊率:743

細胞培養(yǎng)的開始,就是復蘇細胞。如何有條不紊地讓細胞從沉睡中蘇醒?今天就來給大家總結幾個實用小技巧,快點來get!

細胞復蘇流程:

1、將凍存的細胞從液氮罐中取出,立即放入37°C的水浴中進行融化,輕柔晃動,加速融化,直到小瓶中只剩下一小塊冰,時長應控制在1min中;

2、用70%乙醇擦拭瓶外后轉(zhuǎn)移無菌操作臺中,打開瓶蓋前,用酒精燈火焰對瓶口進行消毒;

3、將預加熱的新鮮完quan培養(yǎng)基滴入小瓶中。緩慢用移液槍吸取瓶中液體至15ml離心管中,加入適量濃度和體積的完quan培養(yǎng)基,輕柔混合均勻;

4、200 × g左右細胞懸浮液離心5-10分鐘。實際的離心速度和持續(xù)時間因細胞類型而異。棄掉上清,加入新鮮完quan培養(yǎng)基重懸細胞,并將其轉(zhuǎn)移到適當?shù)呐囵B(yǎng)容器和推薦的培養(yǎng)環(huán)境中。

細胞解凍流程圖

注意事項:

1、液氮溫度低,小心低溫對人造成的傷害,在液相中儲存的冷凍瓶在解凍時存在爆炸的風險,因此,取出凍存管的時候,要做好個人防護。

2、通常細胞集中儲藏在液氮中,取出時應迅速,避免溫差對其他凍存細胞造成影響。

3、復蘇細胞的核心技術,簡而言之就是快融,將在37°C水浴中快速解凍冷凍細胞(< 1分鐘)。

4、解凍時,凍存管先放入無菌一次性PE手套中,再放入水中融化,避免污染也方便操作。

5、用預熱過的培養(yǎng)基慢慢稀釋解凍的細胞。

6、解凍細胞后,在培養(yǎng)皿中培養(yǎng)時,應盡量維持高密度,以提高細胞存活率。

7、注意無菌操作,避免細胞發(fā)生污染。

細胞高效解凍的另一個成功秘訣,就是選擇一款優(yōu)質(zhì)血清!

Ausbian進口特級胎牛血清,有以下優(yōu)點,可以盡可能幫助實驗者提高細胞實驗成功率:

1. 精選內(nèi)毒素更低批次(≤3EU/ml)。是細胞典藏等重大項目十幾年的穩(wěn)定供應品牌。

實驗室有些細胞,需要長期培養(yǎng)、長期凍存,或者經(jīng)常復蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,血清會經(jīng)?;蜷L時間作用于細胞。為保證細胞的健康,都應該選用更低內(nèi)毒素的血清,以避免內(nèi)毒素長久對細胞的毒性影響。

2. 新批次在試用前,提供試用服務,養(yǎng)細胞更放心。

3. 每個批次產(chǎn)量800-2000升,試用滿意的實驗室批號優(yōu)先鎖定,保證大多數(shù)項目兩年不需換批次,細胞試驗數(shù)據(jù)穩(wěn)定。

4. 每年按廠家生產(chǎn)順序,會有多批次平行供應,每個實驗室專屬批號管理,保證供貨穩(wěn)定。

5. 為Ausbian血清用戶免費提供申報支持,具有完整的檢測報告,為各類項目的申報提供支持(同時為血清VIP用戶在支原體檢測、方法學驗證等方面,提供更多免費延伸性技術幫助)。

6. 針對特殊科研項目,可提供3-5個平行批次,讓試驗人有更多選擇空間。

7. 為Ausbian血清提供免費代儲存服務,為儲存空間不足的實驗室提供可靠的血清倉儲保護,按要求隨時發(fā)貨。

8. Ausbian血清從出廠,到實驗室,全程低溫冷鏈保護,確保血清無反復凍融。

9. 免費真品保障,每個血清瓶身加貼Viansaga®易破損防偽標簽,Ausbian品牌真品保護,逢假必究,為實驗室做好售后保障。

10. 免費無憂售后,所有實驗室簽收的Ausbian胎牛血清,從簽收日開始計算,一年之內(nèi),血清在妥善保管、未開封未融化、且不影響二次銷售的情況下,均可享受無條件退貨或換貨的售后保障。

11. 免費專業(yè)幫助,匯集近二十年,千萬個血清用戶細胞培養(yǎng)經(jīng)驗,為各種細胞培養(yǎng)提供問題梳理分析,解決方案參考。


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