牛血清是常用的細(xì)胞培養(yǎng)類(lèi)添加物，其中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分,如蛋白質(zhì)、生長(zhǎng)因子、激素、營(yíng)養(yǎng)物及代謝物、脂類(lèi)、礦物質(zhì)等,為細(xì)胞培養(yǎng)的順利進(jìn)行提供必要的營(yíng)養(yǎng)保障,尤其是新生牛血清的應(yīng)用較為廣泛。

動(dòng)物血清中含有豐富的營(yíng)養(yǎng)成分,如蛋白質(zhì)、生長(zhǎng)因子、激素、營(yíng)養(yǎng)物及代謝物、脂類(lèi)、礦物質(zhì)等,為細(xì)胞培養(yǎng)的順利進(jìn)行提供必要的營(yíng)養(yǎng)保障,尤其是新生牛血清的應(yīng)用較為廣泛。有科研人員通過(guò)凝膠過(guò)濾層析，以及MTT比色法沒(méi)分析新生牛血清中蛋白情況、對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)的影響。

結(jié)果顯示：

通過(guò)層析柱后，能分辨出血清中的蛋白組分相對(duì)比較單一,該血清來(lái)源于新生牛。新生牛血清和成年牛血清在蛋白組分上是有差別的,而凝膠層析就是利用蛋白組分的大小不同來(lái)反映出不同的峰值來(lái)加以區(qū)分的。因此,如果選擇合適的層析柱,可以將血清中的不同組分區(qū)分出來(lái),從而判斷商品新生牛血清中是否含有非新生牛血清的成分,間接評(píng)價(jià)血清的質(zhì)量。

MTT比色法的原理是根據(jù)MTT能被活細(xì)胞線(xiàn)粒體中脫氫酶還原成藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚,并沉積于細(xì)胞中,而死細(xì)胞則不能引起這種變化。甲瓚經(jīng)DMSO溶解后,可直接在酶標(biāo)儀上讀取光吸收值,根據(jù)光吸收值的大小來(lái)判斷活細(xì)胞線(xiàn)粒體中脫氫酶與MTT結(jié)合的量,在一定范圍內(nèi)MTT結(jié)晶物的形成量與活細(xì)胞數(shù)量有線(xiàn)性關(guān)系，是定量檢測(cè)細(xì)胞增殖和生長(zhǎng)的理想方法，依此原理來(lái)判斷培養(yǎng)細(xì)胞的活力和增殖狀況。本試驗(yàn)通過(guò)MTT比色法評(píng)價(jià)新生牛血清、成年牛血清和商品血清對(duì)成纖維細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞的促生長(zhǎng)作用,來(lái)判斷血清的質(zhì)量狀況。通過(guò)細(xì)胞培養(yǎng)增殖的結(jié)果比較差異顯著,說(shuō)明了蛋白組分是影響細(xì)胞培養(yǎng)的重要因素。蛋白組分上看是相對(duì)單一的,具有較好的促細(xì)胞生長(zhǎng)作用，成牛血清蛋白組分上看區(qū)別較大,其促細(xì)胞生長(zhǎng)作用不明顯。

在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,細(xì)胞出現(xiàn)不增殖或者增殖不明顯的原因很多,其中血清質(zhì)量的選擇是不可忽視的重要因素。生產(chǎn)中血源及生產(chǎn)流程的差異,導(dǎo)致了商品血清在實(shí)際應(yīng)用中存在一定質(zhì)量上的差別。Ausbian進(jìn)口新生牛血清，澳洲血源，富含各類(lèi)營(yíng)養(yǎng)成分。